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植物ELISA试剂盒实验操作步骤

发布时间:2019/11/19 14:07:43      阅读次数:143

一、把试剂混匀,切记实验时不要加理大量含有泡沫的液体,避免实验产生误差。

 

二、跟数据测样决定板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

 

三、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔 加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

 

四、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

 

五、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

 

六、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

 

七、每孔加入底物各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。一定要避免光照。

 

八、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

 

九、在450nm波长处测定各孔的OD值。(仅供参考,具体步骤请参考说明书或来电咨询)

 

 

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